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非極性色譜柱廠家分析色譜柱常見問題集錦

  非極性色譜柱廠家談色譜柱常見問題集錦:
  1.拿到一根新柱的時候應該怎樣進行活化及維護?
  新柱活化,實際上是一個平衡的過程,除了用流動相平衡外,有時候還必須用所測樣品對新柱進行平衡,特別是測定分子量比較高的多肽,尤其重要。因為分子量高的物質分子,擴散速度慢,平衡所需時間也相應較長。具體平衡方式也很簡單,多進幾次樣品,直到峰面積和保留時間穩(wěn)定,再進行正式進樣測定。
  如果要加快平衡時間,把前面用來平衡的進樣樣品濃度加大,或者不等洗脫完成,連續(xù)進樣多針。用待測物對新柱平衡,目的是將硅膠基質填料表面具有非特異性吸附的位點的吸附能力飽和掉。
  2.非極性色譜柱的技術都有哪些?這些技術在應用時都體現(xiàn)在哪里?
  非極性色譜柱廠家色譜柱技術包括填料技術和裝柱技術,填料技術自不待言,填料的好壞對色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術也沒有想象中的這么簡單,不同固定相、不同粒徑、不同柱管內徑和長度,裝柱工藝都有所不同,要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床,更多是一門藝術,需要經驗積累。
  3.色譜柱技術的差距在哪里?
  液相色譜柱裝填實際上是有一定技巧和程序,可能還有一些運氣。一般使用高壓勻漿方法裝填。也就是能讓填料在溶劑內均勻地懸浮。然后用瞬間高壓壓實,這實際上用到了不同比例的勻漿液體,和合適的壓力。壓力太大,顆粒破碎,壓力太小,塔板數少。同時壓力需要穩(wěn)定,不然分布不均,拖尾嚴重。同時還有頭上平整程度。套上套,就可以用了。
  4.多個樣品不好不離的時候,該怎么通過選擇合適的色譜柱來提高分離度?
  提高分離度可從三個主要影響因素來考慮,柱效、選擇性和保留因子。可通過減小填料粒徑和增加柱長提高柱效;選擇性和固定相選擇以及pH條件有關,通過選擇合適的色譜柱和合適的pH,可以提高選擇性;有時候適當延長出峰時間增加保留因子,也可提高分離度。
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